1. Cel: Ta procedura ma na celu zapewnienie znormalizowanej procedury operacji aseptycznych i ochrony sterylnych pokoi.
2. Zakres zastosowania: laboratorium testowania biologicznego
3. Osoba odpowiedzialna: Tester Kierownika QC
4. Definicja: Brak
5. Środki ostrożności w zakresie bezpieczeństwa
Ściśle wykonywanie operacji aseptycznych, aby zapobiec zanieczyszczeniu drobnoustrojami; Operatorzy powinni wyłączyć lampę UV przed wejściem do sterylnego pokoju.
6. Procedures
6.1. Sterylny pokój powinien być wyposażony w sterylny salę operacyjną i bufor. Czystość sterylnej pomieszczenia operacyjnego powinna osiągnąć klasę 10000. Temperatura wewnętrzna powinna być utrzymywana w temperaturze 20-24 ° C, a wilgotność powinna być utrzymywana na poziomie 45-60%. Czystość czystej ławki powinna osiągnąć klasę 100.
6.2. Sterylny pokój powinien być utrzymywany w czystości i ściśle nie wolno gromadzić zanieczyszczeń, aby zapobiec zanieczyszczeniu.
6.3. Ściśle zapobiegaj zanieczyszczeniu wszystkich urządzeń do sterylizacji i mediów hodowlanych. Te, które są zanieczyszczone, powinny przestać ich używać.
6.4. Sterylny pokój powinien być wyposażony w środki dezynfekujące stężenie robocze, takie jak 5% roztworu cresolu, 70% alkoholu, 0,1% roztworu chlormetioniny itp.
6.5. Sterylny pokój powinien być regularnie sterylizowany i czyszczony odpowiednim środkiem dezynfekującym, aby zapewnić, że czystość sterylnego pokoju spełnia wymagania.
6.6. Wszystkie instrumenty, instrumenty, naczynia i inne przedmioty, które należy wprowadzić do sterylnego pokoju, powinny być ściśle owinięte i sterylizowane odpowiednimi metodami.
6.7. Przed wejściem do sterylnego pokoju personel musi umyć ręce mydłem lub środkiem dezynfekującym, a następnie zmieniać się w specjalne ubrania robocze, buty, czapki, maski i rękawiczki w buforach (lub ponownie wytrzeć ręce 70% etanolu) przed wejściem do sterylnego pokoju. Wykonaj operacje w komorze bakteryjnej.
6.8. Przed użyciem sterylnego pomieszczenia lampę ultrafioletową w sterylnym pomieszczeniu należy włączyć w celu napromieniowania i sterylizacji przez ponad 30 minut, a czystą ławkę należy jednocześnie włączyć, aby powietrze w tym samym czasie. Po zakończeniu operacji sterylny pokój należy wyczyścić na czas, a następnie sterylizowany przez światło ultrafioletowe przez 20 minut.
6.9. Przed kontrolą zewnętrzne opakowanie próbki testowej powinno być utrzymywane nietknięte i nie można go otwierać, aby zapobiec zanieczyszczeniu. Przed kontrolą użyj 70% bawełnianych kulków alkoholowych, aby dezynfekować zewnętrzną powierzchnię.
6.10. Podczas każdej operacji należy wykonać kontrolę negatywną w celu sprawdzenia niezawodności działania aseptycznego.
6.11. Podczas wchłaniania cieczy bakteryjnej musisz użyć kulki ssącej, aby ją wchłonąć. Nie dotykaj słomy bezpośrednio ustami.
6.12. Igła zaszczepienia musi być sterylizowana przez płomień przed i po każdym użyciu. Po ochłodzeniu kultura można zaszczepić.
6.13. Słomy, rurki testowe, naczynia Petriego i inne przybory zawierające ciecz bakteryjną powinny być przemoczone w wiadrze sterylizacji zawierającym 5% roztworu LYSOL do dezynfekcji oraz wyjęte i przepłukane po 24 godzinach.
6.14. Jeśli na stole lub podłodze rozlewa się ciecz bakteryjną, należy natychmiast wlać 5% roztworu kwasu karbolowego lub 3% LYSOL na zanieczyszczony obszar przez co najmniej 30 minut przed jej leczeniem. Gdy ubrania robocze i czapki są zanieczyszczone płynem bakteryjnym, należy je natychmiast zdjąć i umyć po pod wysokim ciśnieniem sterylizacji pary.
6.15. Wszystkie przedmioty zawierające żywe bakterie muszą zostać zdezynfekowane przed spłukaniem pod kranem. Jest surowo zabronione zanieczyszczenie kanalizacji.
6.16. Liczba kolonii w sterylnym pokoju powinna być sprawdzana co miesiąc. Przy otwartej czystej ławce weź szereg sterylnych naczyń Petriego o wewnętrznej średnicy 90 mm i aseptycznie wstrzykiwać około 15 ml pożywki hodowlanej agarowej, która została stopiona i ochłodzona do około 45 ° C. Po zestaleniu umieść go do góry nogami przy od 30 do 35 inkubowanych przez 48 godzin w inkubatorze. Po udowodnieniu sterylności weź 3 do 5 płyt i umieść je po lewej, środkowej i prawej stronie pozycji roboczej. Po otwarciu osłony i wystawianiu ich przez 30 minut, umieść je do góry nogami w inkubatorze o 30 do 35 ° C przez 48 godzin i wyjmij je. zbadać. Średnia liczba różnych bakterii na płycie w czystym obszarze klasy 100 nie może przekraczać 1 kolonii, a średnia liczba w czystym pomieszczeniu klasy 10000 nie może przekraczać 3 kolonii. Jeśli limit zostanie przekroczony, sterylny pokój powinien zostać dokładnie zdezynfekowany, dopóki powtarzające się kontrole spełniają wymagania.
7. Patrz rozdział (metoda kontroli sterylności) w „Metodach inspekcji higienicznej leków” i „Standardowe praktyki operacyjne w Chinach do kontroli leków”.
8. Dział dystrybucji: Dział zarządzania jakością
Wytyczne techniczne w czystym pokoju:
Po uzyskaniu sterylnego środowiska i sterylnych materiałów musimy utrzymać stan sterylny, aby zbadać określony znany mikroorganizm lub wykorzystać ich funkcje. W przeciwnym razie różne mikroorganizmy z zewnątrz mogą łatwo mieszać. Zjawisko mieszania nieistotnych mikroorganizmów z zewnątrz nazywane jest bakterią zanieczyszczającą w mikrobiologii. Zapobieganie zanieczyszczeniu jest krytyczną techniką pracy mikrobiologicznej. Całkowita sterylizacja z jednej strony i zapobieganie zanieczyszczeniu z drugiej to dwa aspekty techniki aseptycznej. Ponadto musimy zapobiec badanym mikroorganizmom, zwłaszcza patogennym mikroorganizmom lub genetycznie zmodyfikowanym mikroorganizmom, które nie istnieją w naturze, od ucieczki z naszych eksperymentalnych pojemników do środowiska zewnętrznego. Do tych celów w mikrobiologii istnieje wiele miar.
Serylowy pokój jest zwykle małym pokojem specjalnie ustawionym w laboratorium mikrobiologii. Można budować z prześcieradeł i szkła. Obszar ten nie powinien być zbyt duży, około 4-5 metrów kwadratowych, a wysokość powinna wynosić około 2,5 metra. Bufor powinien być ustawiony na zewnątrz sterylnego pokoju. Drzwi bufora i drzwi sterylnego pokoju nie powinny być skierowane w tym samym kierunku, aby zapobiec wprowadzaniu przepływu powietrza do różnych bakterii. Zarówno sterylny pokój, jak i bufor muszą być szczelne. Sprzęt wentylacji wewnętrznej musi mieć urządzenia do filtracji powietrza. Podłoga i ściany sterylnego pokoju muszą być gładkie, trudne do przechowywania brudu i łatwe do czyszczenia. Powierzchnia robocza powinna być pozioma. Zarówno sterylny pokój, jak i bufor są wyposażone w światła ultrafioletowe. Światła ultrafioletowe w sterylnym pokoju znajdują się 1 metr od powierzchni roboczej. Personel wchodzący do sterylnego pokoju powinien nosić sterylizowane odzież i czapki.
Obecnie sterylne pokoje istnieją głównie w fabrykach mikrobiologii, podczas gdy laboratoria ogólne używają czystej ławki. Główną funkcją czystej ławki jest użycie laminarnego urządzenia przepływu powietrza do usuwania różnych drobnych pyłu, w tym mikroorganizmów na powierzchni roboczej. Urządzenie elektryczne umożliwia przechodzenie powietrza przez filtr HEPA, a następnie wejść do powierzchni roboczej, aby powierzchnia robocza była zawsze pod kontrolą płynnego sterylnego powietrza. Ponadto z boku blisko zewnętrznej części zewnętrznej jest szybka zasłona powietrzna, aby zapobiec wejściu zewnętrznego powietrza bakteryjnego.
W miejscach w trudnych warunkach zamiast czystej ławki można również użyć drewnianych sterylnych pudełek. Sterylne pudełko ma prostą strukturę i jest łatwy w ruchu. Z przodu pudełka znajdują się dwa otwory, które są blokowane przez drzwi push-pull, gdy nie działają. Możesz wyciągnąć ręce podczas operacji. Górna część frontu jest wyposażona w szkło, aby ułatwić wewnętrzną operację. Wewnątrz znajduje się lampa ultrafioletowa, a przybory i bakterie można włożyć przez małe drzwi z boku.
Aseptyczne techniki operacyjne odgrywają obecnie kluczową rolę w badaniach i zastosowaniach mikrobiologicznych, ale są również szeroko stosowane w wielu biotechnologiach. Na przykład technologia transgeniczna, technologia przeciwciał monoklonalnych itp.
Czas po: Mar-06-2024